為什麼考馬斯亮藍法測得的蛋白質濃度越高,吸光度越低50

發布 健康 2024-02-09
5個回答
  1. 匿名使用者2024-02-05

    透明質酸中的蛋白質是指蛋白多醣中的蛋白質嗎,是否應該考慮從中去除醣胺聚醣並純化蛋白質,因為考馬斯亮藍需要與蛋白質結合才能顯色,樣品中的醣胺聚醣可能會有影響,或者樣品被汙染。

    考馬斯亮藍溶液應該是酸性的,如果變成藍綠色,就不應該再使用。

    此外,樣品中的tris、醋酸、2-巰基乙醇、EDTA等物質對實驗結果有少量的顏色干擾,做標準曲線時可用緩衝液代替蒸餾水,可以扣除干擾,但大量去汙劑如SDS對顏色影響太大,不易去除, 所以我們只能找到一種方法從樣品中去除洗滌劑

  2. 匿名使用者2024-02-04

    你對標準蛋白質曲線做得很好嗎? 我這兩周做過乙個蛋白質測定的實驗,測定吸收峰不規則的主要原因應該是試劑的問題,市面上很多蛋白和亮藍質量都差,亮藍的效果就算是進口也不好, (我買的第一款試劑,無法測量標準蛋白的吸光度)建議找個大一點的公司,換試劑,效果應該不錯,亮藍和蛋白的結合特異性還是很強的,這個方法不容置疑。

  3. 匿名使用者2024-02-03

    含量(%)的計算公式如下:蛋白質濃度(g ml)取樣體積(ml)絕對分子系質量稀釋因子(ml)100%。 即:

    含量 (%) 蛋白質濃度 ( g ml ) 取樣體積 (ml) 絕對分子量 稀釋因子(ml) 其中,絕對分子量是蛋白質的分子量,一般來說,1克蛋白質的絕對分子量是1,000,000微克,因此,蛋白質的絕對分子量計算為:蛋白質質量(克)1,000,000微克。 稀釋因子用於表示樣品的稀釋因子,一般來說,稀釋因子可以認為等於樣品體積。

    因此,蛋白質含量(%)的計算公式為:蛋白質濃度(g ml)樣品體積(ml)蛋白質質量(g)1,000,000微克樣品體積(ml)100%。

  4. 匿名使用者2024-02-02

    考馬斯亮藍法。

    確定蛋白質濃度的原理。

    考馬斯亮藍方法使用蛋白質染料來測定蛋白質濃度。

    偶聯原理,一種用於定量測定痕量蛋白濃度的快速靈敏方法。 這種蛋白質測定被廣泛使用,因為它比其他幾種方法具有突出的優勢。 這種方法是目前最靈敏的蛋白質測定方法。

    考馬斯G-250染料在酸性溶液中與蛋白質結合,使染料的最大吸收峰(Lmax)的位置從465nm變為595nm,溶液的顏色也從棕黑色變為藍色。 可以通過測量 595 nm 處光吸收的增加來確定與其結合的蛋白質量。 研究發現,染料主要與蛋白質中的鹼性氨基酸有關,尤其是精氨酸。

    和芳香族氨基酸殘基。

  5. 匿名使用者2024-02-01

    分子結構如右圖所示。

    考馬斯亮藍色。

    有兩種型別,G-250 和 R-250。

    考馬斯亮藍G-250在有民突襲哥狀態下為紅色,最大吸光率為465nm; 當它與蛋白質結合並變成青色時,蛋白質-色素結合橋在 595 nm 的波長處具有最大的光吸收。 其光吸收值與蛋白質含量成正比。

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