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大腸桿菌測定。
將曙紅藍平板上的典型大腸桿菌菌落接種到營養瓊脂平板中,並在(36土壤1)下培養18 h-24 h。 每盤至少挑選 2 個菌落。 選取上述菌落的純培養物,用生化培養基和乳糖發酵管接種,(36 Shi 1)0C培養24 h後觀察結果。
區分大腸桿菌和非大腸菌群疫苗的測試方法。
靛藍基質測試:
滴加kovacs的靛藍基質試劑,混入靛藍基質測試介質中,靜置,觀察結果。
有紅色環的人是陽性的; 那些有黃色環的人是陰性的。
甲基紅(MR)測試:
滴加甲基紅指示劑M 1,混入MR-VP培養基中,觀察結果。
紅色的存在是積極的; 黃色的存在是陰性的。
VP測試:
滴加VP試劑溶液0在MR-VP培養基中混勻2ml,然後滴加VP試劑B溶液混勻,靜置觀察結果。 如果在15分鐘內出現紅色,則為陽性反應; 那些沒有顏色變化的人是負面的。
如果在1小時後再次觀察到陰性結果,則出現紅色也是陽性反應。
西蒙森檸檬酸鹽試驗:觀察介質的顏色變化,藍色呈陽性; 沒有變色是負面的。
大腸桿菌鑑定結果。
靛藍基質 MR VP Simonson 的檸檬酸鹽鑑定。
典型的大腸桿菌。
非典型大腸桿菌。
典型的枸櫞酸桿菌。
非典型枸櫞酸桿菌。
典型的產氣腸桿菌。
非典型氣源性腸桿菌。
如果存在表1以外的生化反應,則表明培養物可能不純,應重新劃線和分離,必要時應進行重複測試。
報告結果。 1m VIC 測試的結果是 ++1。
1.對於在1+11和乳糖發酵管中產生氣體的人,檢查EC肉湯的氣管產生管的數量及其稀釋比例。
編號,並根據附錄 B(資訊附錄)中的 MPN 搜尋表報告了樣品中的大腸桿菌 MPN A (ml) 值。
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Echina-Melin 培養基是一種用於識別大腸桿菌的鑑定培養基,如果存在大腸桿菌,大腸桿菌會變成紫色並具有金屬光澤。
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紅色和藍色試劑可以鑑定腸桿菌科。
腸桿菌科測定。
曙紅藍平板典型的腸桿菌菌落接種營養瓊脂平板(36個土壤1個)培養至少18小時,每個平板。
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法律分析]:國際標準化組織,食品中腸桿菌標準。
ISO 16654 AMD 1-2017 食品和動物飼料微生物學。 檢測大腸桿菌水平的方法 0157. 修改1:附錄B:實驗室粉塵研究結果。
ISO 16654 AMD 1-2017 食品和動物飼料微生物學。 檢測大腸桿菌水平的方法 0157. 修改1:附錄B:實驗室的研究結果。
ISO TS 13136-2012食品和動物食品微生物學。 基於實時聚合酶鏈反應(PCR)的方法用於檢測食源性病原體。 測定 O157、O111、O26、O103 和 O145 血清型和產志賀毒素大腸桿菌 (STEC) 水平。
ISO 16654-2001 食品和動物飼料微生物學檢測大腸桿菌水平的方法 0157。
關於食品大腸桿菌檢測標準。
MSZ 3620 1-1972 罐頭食品檢測:大腸桿菌含量檢測。
MSZ 3612罐頭食品大腸桿菌測試。
行業標準 - 商檢,食品大腸桿菌檢測標準。
SN T 3640-2013 PCR法檢測出口食品中引起腹瀉的大腸桿菌的方法。
環介導的等溫擴增(LAMP)檢測SNT出口食品中的致病菌。 第 2 部分:大腸桿菌 O157
SN T 0169-2010 進出口食品中大腸菌群、糞大腸菌群和大腸桿菌的檢測方法.
SN T 0973-2010 進出口肉類、肉製品等食品中腸出血性大腸桿菌O157:H7的檢測方法。
SNT 檢測食品和動物飼料中大腸桿菌 O157 的方法。 免疫磁珠法。
法律依據]:《中華人民共和國標準化法》第二條 本法所稱標準(含標準樣品)是指農業、工業、服務業和社會事業領域需要統一的技術要求。
標準包括國家標準、宴會行業標準、地方標準、團體標準、企業標準等。 國家標準分為強制性標準和推薦標準,行業標準和地方標準是推薦標準。
必須執行強制性標準。 國家鼓勵採用建議的標準。
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1.發酵法。
該方法主要用於在含有螢光底物的下層培養基上培養大腸桿菌,需要培養24 h。 然而,螢光底物的釋放需要葡萄糖醛酸才能使介質在紫外光下發出螢光。
通過這種方式,也可以對原始樣本中的菌落進行統計估計。 主要步驟包括發酵、分離培養、二次發酵、顯微觀察等。
2.膜法。
該方法的主要工藝是向過濾器中加入約10毫公升的無菌水,然後加入一些無菌水清洗過濾器內壁,然後過濾,將過濾器凱仔報警膜放入M-FC介質中,兩者之間不能有氣泡,然後密封,在溫度下儲存約24h, 直到大腸桿菌的菌群變成藍色或藍綠色。
然後記錄資料,估計每單位水溶液的微生物群落數,並轉換大腸桿菌值。
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1.大腸桿菌測定方法:在36攝氏度下將曙紅藍平板上的典型大腸桿菌菌落接種到營養瓊脂平板中。
孵育18至24小時。
2.每盤至少挑選 2 個菌落。 假裝是兄弟。
3.選擇上述菌落的純培養物並連線霍爾隱種363生化培養基。
和乳糖發酵管,在36°C下孵育24小時觀察結果。
4.大腸桿菌和非大腸桿菌幼苗鑑別試驗方法靛藍基質試驗:滴加一毫公升kovacs靛藍基質試劑混入靛藍基質試驗介質中,靜置,觀察結果。
5.有紅色環的人是陽性的;
6.黃色環的出現是反應粉塵的純度。
7.大腸桿菌是大腸桿菌屬的代表細菌。
8.一般不致病,是人畜腸道中的常駐菌,在一定條件下可引起腸外感染。
9.一些血清型具有高度致病性並引起腹瀉,統稱為致病性大腸桿菌。
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細菌的分離和鑑定。
1.標本:尿液、血液、膿液、腦脊液等取自腸道感染中間,糞便取自腹瀉者。
2.分離、培養和鑑定:糞便標本直接接種腸桿菌科選擇性培養基。 在移植到血瓊脂平板中之前,需要用肉湯富集血液。
其他標本可以接種血瓊脂平板和腸桿菌科選擇性培養基。 37 孵育18 24小時後,觀察菌落和塗片染色的顯微鏡檢查。 使用一系列生化反應進行鑑定。
在檢測腸道致病性大腸桿菌之前,應進行血清型學檢測。 必要時檢測腸毒素。
除了識別大腸桿菌外,泌尿系統還應以每毫公升尿液 100,000 個細菌的水平進行計數,以便進行診斷。
衛生細菌學檢查。
大腸桿菌不斷隨糞便排出體外,汙染周圍環境、水源、食物等。 樣本中的大腸桿菌越多,樣本被糞便汙染的可能性就越大,樣本中存在腸道病原體的可能性就越大。 因此,應對飲用水、食品和飲料進行衛生細菌學檢查。
1.細菌總數:檢測每毫公升或克樣品中所含的細菌數,並採用澆注培養物進行計算。 我國的衛生標準是,每毫公升飲用水的細菌總數不應超過100個。
2.大腸菌群數指數:指每公升大腸菌群數,用乳糖發酵法檢測。 我國衛生標準為每1000ml飲用水不超過3個大腸菌群; 瓶裝蘇打水、果汁等,每100毫公升不應超過5個大腸菌群。
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用曙紅靛藍染色檢測,大腸桿菌群落呈深紫黑色、光滑、濕潤、金屬圓形菌落。 它有強烈的腐臭味。
該病多為急性敗血症,新孵化的小鴨發病後體弱,閉眼閉頸,腹圍較大,常有腹瀉,多因敗血症死亡; 體型較大的小鴨發病後情緒低落,食慾不振,翅膀下垂,站在一邊,頭向下彎曲,嘴角接觸地面,眼睛和鼻孔常附著分泌物,有的病鴨拉青稀便,呼吸困難,常因敗血症或體力衰竭,脫水而死亡; 成年病鴨喜歡躺著,不願動彈,站立時腹圍腫松如企鵝,觸診時有液體波動感,穿刺排出腹水。 屍檢時,肝臟腫大,呈青銅色或膽汁狀,銅綠,易碎; 脾臟腫大,有紫黑色斑紋; 卵巢出血,肺淤血,出血和水腫; 全身漿膜以急性滲出性炎症為特徵,黃白色纖維蛋白滲出物附著於心包、肝包膜和氣囊壁表面; 腹膜滲出性炎症,淡黃色腹水; 腸粘膜的卡他性或壞死性炎症; 有的病鴨蛋黃破了,腹腔裡混有蛋黃物質; 有些小鴨的蛋黃吸收不完全,病理變化如金屬炎。 為了確認診斷,有必要將其送到實驗室進行病原菌的分離和鑑定。 >>>More
目前,我國養鴨場和養殖戶已經認識到大腸桿菌病是一種環境病。 因此,應降低鴨的飼養密度,及時清理鴨舍和運動場內的糞便和汙水,為鴨提供舒適乾淨的養殖環境,保持鴨舍乾燥衛生,改善通風,減少灰塵,降低氨含量, 並定期對鴨舍、運動場、器皿、器材等進行消毒。 採用“全進全出”系統,對鴨舍內外進行徹底消毒; 用特殊配方的大腸桿菌疫苗進行免疫接種具有一定的預防作用。 >>>More