為什麼電泳時分子量大在後面，而色譜柱在前面分子量大

根據分離物質的分子量和電荷的差異進行電泳。 在電泳過程中，大分子量移動緩慢，小分子量移動快，因此電泳一段時間後，大分子量落後。

對於色譜柱，所有者應參考凝膠過濾（色譜柱的種類很多，如離子交換色譜、親和層析等，分離原理不同），這是根據分離物質的大小而定的。 簡單來說，凝膠過濾中填充的物質含有許多小孔隙，在待分離的物質中，大分子量不進入小孔，直接隨洗脫液流出，小物質進入這些小孔，穿梭在這些空氣中，洗脫液自然流出。

由於其分子量大，電泳時分子量在後面，每個分子提供的電量相等 mv=mv

M>M，所以 V< V 分子量在後面較大。 柱子前面分子量大，因為分子量大，體積大，很難通過篩板（過濾器），小的可以，所以在頂部（前面）

瓊脂 糖。 它是一種從瓊脂中純化的線性多醣，由 D-半乳糖和 3,6 無水 L-半乳糖連線。 瓊脂糖凝膠是通過放置幹瓊脂糖懸浮緩衝液製成的。

，通常濃度為1%-3%，加熱煮沸至溶液變清，注入模板中再室溫冷卻冷凝，即得瓊脂糖凝膠。 瓊脂糖在DNA備份電泳中用作固體支援基質。 瓊脂糖在分子內和分子間氫形式中具有相對穩定的交聯結構，這使得瓊脂糖凝膠具有更好的抗對流效能。

瓊脂糖凝膠的孔可以通過瓊脂糖的初始濃度來控制，瓊脂糖形孔的濃度較低，瓊脂糖形狀的孔較小。 雖然瓊脂糖本身不帶電荷，但一些聚醣可能被羧化。

甲氧基特別硫酸鹽。

不同程度的取代使瓊脂糖凝膠表面具有一定的電荷，在電泳過程中引起樣品與凝膠之間的電滲透和靜電相互作用，影響分離效果。

瓊脂糖凝膠可用作蛋白質和核酸的電泳支援介質，特別適用於核酸的純化和分析。 例如，濃度為1%的瓊脂糖凝膠的孔隙對於蛋白質來說比較大，對蛋白質的阻礙作用較小，因此蛋白質分子大小對電泳遷移率的影響相對較小，因此一些電泳技術忽略了蛋白質的大小，僅根據蛋白質的自然電荷將其分離， 如免疫電泳、電聚焦電泳等板等。 瓊脂糖也適用於DNA和RNA分子的分離分析，因為DNA和RNA分子通常較大，因此在分離過程中會有一定的摩擦阻礙，分子的大小會對電泳遷移率產生重大影響。

例如，對於雙鏈DNA，電泳遷移率的大小與DNA分子的大小有關，但與鹼基有關。

安排和組無。 此外，一些低熔點的瓊脂糖在62°C時熔化，樣品（例如DNA）可以通過將其放在加熱至熔點的水浴中一段時間來重新溶解到溶液中。

由於瓊脂糖凝膠的彈性較差，難以從管中取出，因此一般的瓊脂糖凝膠不適合管式電泳，管式電泳通常採用聚丙烯醯胺凝膠。 瓊脂糖凝膠通常是水性平板凝膠，用於等電聚焦和免疫電泳等蛋白質的電泳，以及用於DNA和RNA的分析。 垂直電泳相對較少使用。

列。 很麻煩，很難解釋，自己看看：

氣相法是如何製備的???

氣相資料的集中帖子。

三閥（六通閥）四柱注射分離原理（串聯）。

氣相色譜常識。

氣相色譜分離的原理。

氣象色譜法原理：

色譜過程示意圖。

色譜法原理（這篇文章中有很多應該有你需要的東西）。

氣相色譜基礎知識 - 基礎知識（免費PPT）。

真誠地希望能夠幫助您。

大質量的慣性大，小質量的慣性小。

當然，它是第乙個膨脹體積大的峰值，分支膨脹體積很大。

膠水解像度不夠 大碎片移動時，速度很慢，碎片之間的距離無法拉伸，肉眼無法清楚地看到條帶。

對於分子量非常大的碎片，可以使用脈衝場凝膠電泳。 也可以延長電泳時間（此時前面的小DNA可能會從凝膠中耗盡。 如果您只尋找大片段，仍然可以延長電泳時間。

畢竟脈衝場凝膠電泳需要特殊的裝置，而且很麻煩。

一般來說，大分子量會有一些拖尾，但不會那麼嚴重。 這可能有一些原因：1、電泳電壓過高; 2.緩衝區放置時間過長; 3.凝膠質量不理想（這對您的結果來說可能性不大）; 4.凝膠濃度高。

應該是大片段容易降解，而且你已經執行了很長時間，所以緩衝液一般需要新，注意DNase的汙染，並且沒有樣品濃度過高，可以嘗試幾何多重稀釋的梯度。 當然，如果要執行大分子，就必須降低膠水的濃度。

凝膠色譜柱和SDS本質上是不同的。

當含有各種分子的樣品溶液緩慢流過凝膠柱時，每個分子在柱內同時以兩種不同的運動運動：垂直向下運動和無向擴散運動。 由於其直徑大，大分子物質不易進入凝膠顆粒的微孔，而只能分布在顆粒之間，因此在洗脫過程中迅速向下移動。

小分子物質除了在凝膠顆粒之間的間隙擴散外，還可以進入凝膠顆粒的微孔，即進入凝膠相，在向下移動的過程中，從乙個凝膠到顆粒間隙再進入另乙個凝膠顆粒，使小分子物質的下行速度落後於大分子的下行速度， 使樣品中的大分子先流出塔外，中分子流出，最小分子最後流出。至於凝膠顆粒能阻礙分子有多小，則與分子篩的孔徑有關。

SDS-PAGE通常使用不連續緩衝系統，其解像度可能高於連續緩衝系統。 堆積凝膠的作用是具有堆積作用，凝膠濃度小，孔徑大，將較薄的樣品加入堆積凝膠中，將大孔徑凝膠的遷移濃縮到狹窄的區域。 當選擇樣品溶液和堆積凝膠作為Tris HCl緩衝液時，選擇電極溶液作為Tris甘氨酸。

電泳開始後，HCl解離成氯離子，甘氨酸解離少量甘氨酸根離子。 蛋白質帶負電，因此它們一起向正極移動，其中氯離子最快，甘氨酸離子最慢，蛋白質居中。 在電泳開始時，氯離子游動速率最大，超過蛋白質，因此在背面形成低電導區，電場強度與低電導區成反比，從而產生較高的電場強度，使蛋白質和甘氨酸離子快速移動， 形成穩定的介面，使蛋白質聚集在移動介面附近並濃縮成中間層。

在這種鑑定方法中，蛋白質的遷移率主要由其相對分子質量決定，與其電荷和分子形狀無關。

我認為這與沸石的孔徑有關，sds-page的孔徑較大，所以無論分子量是多少，它都會通過孔，所以最後留下了大蛋白質，凝膠色譜的孔徑較小，質量蛋白不通過孔徑， 但是通過毛孔的縫隙，路徑要短得多，所以大的先出來

我不知道是不是這樣

我不知道你到底在測量什麼物質，但如果你的分子量相同，你就無法分辨出區別。

瓊脂糖凝膠可用於破壞蛋白質和核酸電泳的支援培養基，特別適用於核酸的純化和分析。 例如，濃度為1%的瓊脂糖凝膠的孔隙對於蛋白質來說比較大，對蛋白質的封閉作用較小，因此蛋白質分子大小對電泳遷移率的影響相對較小，因此適用一些忽略分輪蛋白大小，僅根據蛋白質的自然電荷分離蛋白質的電泳技術

呵呵，一般小分子的測量在100A左右，普通大分子的測量為300A，一般孔徑應略大於或等於分子直徑的3倍。

有圖片嗎？ 什麼牌子？ 直接詢問供應商的技術支援。 這可能是產品問題。

你做什麼電泳？ 使用哪種膠水？ 可能是膠水的比例不足以分離大分子量。

如今，大多數蛋白質標記物可以直接電泳，不需要還原。

有減少嗎（我不知道如何翻譯）？ 如果沒有還原，蛋白質分子天然結構外表面上的極性氨基酸殘基將不足以為電泳提供必要的電荷量。