分離細菌菌落的微生物學檢查方法

印版打標法和稀釋塗佈法，印版法已經說過了，所以先不說了，我們再說塗佈法吧。 所謂稀釋包衣，就是將細菌溶液稀釋100倍（用移液管。

混合均勻後，用移液管取幾滴混合的細菌溶液，滴加到預先準備好的平板中，用環形玻璃棒均勻地塗覆細菌溶液以覆蓋介質。

蓋上蓋子，放入 30 度培養箱中 24 小時。 但是，我個人認為划板法不錯，容易選擇和取細菌。

板劃線方法：

1.倒入無菌板，配製無菌水，配製培養基，滅菌，倒入板。

2.將待分離細菌的樣品溶於水中，製成懸浮液或細菌懸浮液。

3.無菌操作，浸入接種環液，並將其分離在板中。

4.將板在合適的溫度下在培養箱中孵育。

數小時或48小時後，進行觀察板並挑選單個菌落轉移斜面。

6.培養斜坡上長滿真菌後，顯微鏡檢查，如果不純，重複上述實驗步驟。

稀釋包衣法。

1.準備無菌水、無菌板培養基、無菌移液器和包衣機。

2.用無菌水配製細菌懸浮液。

3.稀釋細菌懸浮液的濃度，按細菌懸浮液的濃度（如每細菌ml9倍的10倍），稀釋至負7倍的10倍。

4.取液體在10負負5力無菌水中，接種在平板上，塗上。

5.鋪開盤子，做標記，放入培養箱培養。

6. 如果單個菌落生長，則選擇單個菌落轉移到斜面。

7.培養斜坡上長滿真菌後，顯微鏡檢查，如果不純，重複上述實驗步驟。

這種方法也可以在微生物學實驗書中找到。

補充一句話：還有其他分離方法，如難以分離的細菌，可採用梯度離心、厭氧管滾動法等。

主要有 1.稀釋。

BAI倒板法。

首先，將 DU 微生物懸浮液在一系列 DAO 中稀釋（例如：

10000），然後取少量不同稀釋液，與已熔融並冷卻至50左右的瓊脂培養基混合，搖勻，倒入滅菌的培養皿中，瓊脂凝固後製成可能含有細菌的瓊脂平板，孵育一定時間後即可出現菌落。如果適當稀釋，單個分散的菌落可以出現在平板表面或瓊脂培養基中，這可能是由單個細菌細胞的繁殖形成的。

然後對單個菌落進行採摘或重複幾次以獲得純培養物。

2.，稀釋塗佈板法。

將熔融的培養基倒入無菌板中製成無菌板，冷卻固化後，在板表面加入一定量的微生物懸浮液滴，然後用無菌玻璃塗層棒將菌液均勻分散到整個板表面，培養後挑出單個菌落。

3.板標線法。

微生物樣品通過固體培養基表面的多次“點對線”稀釋液分離。

4.稀釋搖管法。

首先，將一系列含有無菌瓊脂培養基的試管加熱熔化瓊脂，然後冷卻並保持在50左右，用這些試管將待分離的材料梯度稀釋，快速搖勻試管，冷凝後，將滅菌的液體石蠟和固體石蠟的混合物倒在瓊脂柱表面，使介質與空氣分離。

總結。 獲得的菌落數量少可能有幾個原因：1

微生物對培養條件有嚴格的要求，如培養基、溫度、pH值、含氧量等，會影響微生物的生長，如果條件不合適，會導致微生物生長緩慢或死亡; 3.技術操作不當：操作不規範、培養皿密封不良、汙染等也會影響實驗結果。

例如，實驗室器皿在分離前應消毒，以避免外源性細菌汙染。 4.儲存條件不當：

如果儲存不當，分離的細菌會導致菌落數量減少，例如溫度過高或過低、儲存時間過長等。

細菌分離培養和純化實驗中獲得的菌落數量少的原因是什麼？

它應包括操作和栽培條件的個人原因。

在分離、培養和純化實驗中，如果樣品本身含有多種微生物，會影響特定微生物的生長和分離; 2.培養條件不合適：微生物對培養條件有嚴格的要求，如培養基、溫度、pH值、含氧量等，會影響微生物的生長，如果條件不合適，會導致微生物生長緩慢或死亡; 3.

技術操作不當：操作不規範、培養皿密封不良、汙染等也會影響實驗結果。 例如，實驗室器皿在分離前應消毒，以避免外源性細菌汙染。

4.儲存條件不當：分離的細菌如果儲存不當，如溫度過高或過低、儲存時間過長等，會導致菌落數量減少。

有許多方法可以分離和純化微生物。 例如，培養基法。

主要有 1劃線方法2倒板法3

包衣法 根據分離菌株選擇不同的介質，稀釋混合倒置板法、稀釋包衣板法、板標分離法、稀釋搖管法、液體介質分離法、單細胞分離法、選擇性培養分離法等。 這些方法中的前三種。

通常使用孢子分離。 它可用於所有菌株。

剝離或塗覆板。

在各種實驗中，往往需要病原菌的純培養物，以研究病原菌對寄主植物的形態、生理、生態和致病性。 分離和培養是植物病害實驗最基本的技術之一。 病原菌的分離方法因材料而異。

真菌病害最常見的方法是鬆弛組織分離、直接真菌提取和真菌表面消毒。

1）組織分離法的主要步驟是：取病變和健康的連線病變組織;在70%乙醇中浸泡幾秒鐘; 在10%次氯酸鈣溶液中滅菌3 5min; 用無菌水洗滌3次，每次3min; 然後將其直接轉移到PSA平板培養基（或其他合適的培養基）中，並在培養箱中倒置孵育，以使菌落在純化前生長。

2）直接真菌提取法的主要步驟是：用真菌取病組織;在低倍顯微鏡下，用玻璃針或其他細針狀材料直接獲得真菌的分生孢子或菌絲體; 或取玻璃球分生孢子，用抑制細菌的抗生素塗抹在瓊脂平板上，倒置平板在培養箱中培養，6小時後等待孢子萌發，用細接種針在低倍顯微鏡下直接挑取真菌萌發的孢子的分生孢子或芽管; 將上述獲得的菌絲體、分生孢子或發芽管轉移到PSA傾斜培養基或平板培養基（或其他合適的培養基）中; 將培養基放入培養箱中並孵育。

3）細菌直接表面消毒法的主要步驟是：取催眠子（如菌核或菌絲體）;在70%乙醇中浸泡3-8min; 或將狀態鏈浸泡在70%B輪履帶酒精中幾秒鐘，用10%次氯酸鈣溶液消毒5 8min; 用無菌水洗滌3次，每次3min; 然後將其直接轉移到PSA平板培養基（或其他合適的培養基）中，並在培養箱中倒置孵育，以使菌落在純化前生長。