在大學基因工程考試中，有三大問題需要專家回答！ 緊急！

4.以mRNA為模板，經逆轉錄酶催化，體外逆轉錄成cDNA，並用合適的載體（常用噬菌體或質粒載體）連線轉化受體細菌，每個細菌都含有一段cDNA，可以繁殖擴增，這樣收集的含有細胞全部mRNA資訊的cDNA轉殖稱為組織細胞的cDNA文庫。

原核生物沒有多毛尾巴，也不容易逆轉錄。

甲醇可以快速用作碳源，而MUSES不能使用甲醇作為碳源。 因此，MUT+也可以在甲醇（mm）板中快速生長，而MUTS只能在葡萄糖（MD）板中快速生長。

6.Nick 翻譯是一種利用大腸桿菌 DNA 聚合酶 I 的酶活性將標記的 DNTP 摻入新形成的 DNA 鏈中以形成統一標記的高特異性活性 DNA 探針的方法。 其工作原理如下：

1）將1ug的DNA溶於少量無菌雙蒸水中，加入5？約10個切口翻譯緩衝液（Tris HCl，; mol/l mgso4 ；1毫摩爾l二硫蘇糖醇; 500?g ml牛血清白蛋白），加入標記物（如？

32 p-datp）和其他三種 dntps（例如，DCTP、DGTP、DTTP）的 1 μl 溶液和 20 mM L 溶液l。

2） 加 100？ci(10?l）標記液，加入無菌雙蒸水至最終體積，混勻，加稀釋的DNAsei溶液，混勻;加入 1 ul（約 5 個單位）的 DNA 聚合酶 I 並充分混合。

3） 等待 14-16 小時的反應。

4.看高中生物選修三。

1）在基因工程中。

獲得目標基因的方法主要有兩種，即人工合成和從生物材料中分離出來，人工合成可以通過逆轉錄或人工化學合成來實現，而從生物材料中分離是通過基因庫法

2）由於cDNA文庫僅包含葉細胞轉錄（或表達）的基因，而基因組文庫包含植物的所有基因，因此兩個文庫中所含的基因數量少於基因組文庫中的基因數量與基礎過剩相比

3）基因表達載體的組成包括靶基因+啟動子。

終止子+標記基因，其中啟動子是RNA聚合酶。

識別和粘合的部位; 就原核生物而言。

受體細胞是基因表達載體，由於細菌繁殖速度快，最常用於原核生物，如大腸桿菌

4）基因槍是單子葉植物。

我國常用的一種基因轉化方法，常用的攜帶靶基因的金屬顆粒是金粉和鎢粉顆粒，成本高

所以答案是：1）合成生物材料。

2）cDNA文庫僅包含葉細胞轉錄（或表達）的基因，而基因組文庫包含鄭禪對植物的所有基因。

3）RNA大腸桿菌（或細菌）。

4）金粉：鎢粉。

核心步驟：構建基因表達載體。

基因工程原理：基因重組。

成功理由：不同生物體的DNA具有相同的物質基礎（均以脫氧核苷酸為基本單位）和結構基礎（均具有雙螺旋的空間結構），幾乎所有生物體都共享一組遺傳密碼。

PCR的原理：DNA複製。

引物在復性過程中與PCR模板結合的依據是什麼？ 這個我不明白的問題你想問什麼，結構是氫鍵，原理是鹼互補原理，方法是冷卻到72-75

用於常規PCR擴增的DNA聚合酶最重要的特徵是它們具有耐高溫性。

目的基因的整合位點是隨機的，不一定只整合單個質粒，但也有可能整合多個位點，比如整合2個抗性基因，乙個可能在一對同源染色體上，另乙個可能在兩條非同源染色體上。 在前者的情況下，植物將變為純合子（RR）以產生抗性，並且後代相對於野生型植物（RR）應具有所有基因型和表型抗性。 如果是後者，轉化的植株雖然有2個抗性基因，但位於非同源染色體上，相當於雜交時非同源染色體基因之間的自由組合，只要配子中含有抗性基因（R）並與野生型配子（R）結合，就會產生抗性植物，2個R對配子的概率為25%， 乙個R的概率為50%，1個R的概率為25%，因此後代表性型將具有3：1的分離比，這與植物2與野生型雜交的結果相同。

植物 1 應該只將乙個 R 整合到基因組中。 這種與隱性純合子雜交的方法就是測定雜交。 抗性植物選擇是將外植體接種到含有卡那黴素的培養基中進行篩選。

這對相對特徵符合孟德爾分離定律和自由組合定律。 錯誤的是 b。

分析問題，從抗性與非抗性後代數的比例分別為1：1和3：1，並且由於野生型（非抗性）AA，可以推斷出抗性佔主導地位，A是正確的。

b 如果它們都在同源染色體上，那麼植物 2 的基因型是 AA，與 AA 雜交的後代都是抗病的，B 是錯誤的。 c.獲得抗病基因的細胞應通過植物組織培養進行培養 d.基因工程是DNA是可遺傳的，因此遵循孟德爾遺傳定律。 如果有什麼問題，請告訴我。 謝謝。

b 如果是在同源染色體上，在這種情況下不會是 3：1，只有 AA*AA 就可以了，但野生型是純合子......

你的懷疑是正確的，也是可以理解的。 我個人認為，問題作者的意思是，在靶基因的兩端都有這兩個酶位點，而且這些酶位點是可以分開的。 例如---e1-e1、e1--b1---e1、e1-b1---e1-b1、b1--e1---b1-e1

理想情況下，雙重消化只產生乙個基因。 但是，如果消化位點重疊或非常接近，消化就不會像您擔心的那樣完全，從而導致複雜的多個產物。

我個人認為，問題作者的意思是，在靶基因的兩端都有這兩個酶切割位點，並且這些切割位點可以完全分離。 但寫問題的人沒有讓你全面思考，或者缺乏實際工作經驗。 因為在實際工作中，你擔心的問題經常出現，影響工作效率。

你比寫問題的人更好。 藍色比藍色好！

多項選擇題：人們通常用於攜帶基因工程遞送載體的細菌質粒分子通常攜帶抗生素抗性基因，1一些感興趣的基因不直接在生物體的性狀中表達，因此目的可能不可見。

限制性內切酶用於質粒，限制性內切酶用於靶基因。 因為目的基因需要在兩側切割，所以答案顯然是使用限制性內切酶。 那麼質粒上有兩個標記基因，如果也使用限制性內切酶，那麼兩個標記基因都會被破壞，在下一步的篩選中就沒有用處了。

所以使用限制性內切酶 1 進行切割。 然後，需要能夠在含氨苄青黴素的培養基中存活，但不能在含四環素的培養基中存活的重組質粒。

很簡單，如果我回到高中，但現在我提前從大學畢業...... 忘記了親愛的。

a.標記基因是具有已知功能或已知序列的基因，可以作為標記發揮特定作用。 在基因工程的意義上，它是重組DNA載體的重要標誌物，通常用於測試轉化的成功與否。 在基因定位的意義上，它是一種標記目的基因的工具，通常用於檢測目的基因在細胞中的定位。

所以乙個錯誤。 b.逆轉錄是以從靶基因轉錄的信使RNA為模板，逆轉錄成互補的單鏈DNA（cDNA），然後在酶的作用下合成雙鏈DNA，得到所需的基因。

它是基因工程中提取靶基因的重要方法之一。

胰島素可以從胰腺B細胞中提取，因此信使RNA可以作為模板提取。

所以 B 對。 c.將目的基因引入受體細胞是實施基因工程的第三步。

所以 C 錯了。 d.基因工程涉及的工具酶種類繁多，大致可分為四類：限制性內切酶、連線酶、聚合酶和修飾酶。 其中，限制性核酸內切酶和DNA連線酶在分子轉殖中起著最突出的作用。

所以錯了。 希望能解答大家對生物學的疑惑，希望能幫助大家在這門學科上取得好成績！

如果靶基因選擇錯誤，只能方便篩選靶基因，而不能促進靶基因的表達。

B是正確的，胰腺B細胞分泌胰島素，因此細胞中含有合成胰島素的信使RNA;

c 錯誤，不是基因突變，而是基因重組;

D是假的，不是DNA聚合酶，是DNA連線酶。

希望對你有所幫助。 ^_