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聚合酶鏈反應(PCR)是在短時間內對極少量的特定核酸在試管中進行百萬倍(106 109)擴增,因此也被稱為基因擴增技術,其靈敏度遠遠超過包括放射免疫測定在內的所有血清學檢測。 它是目前世界上最先進的傳染病和遺傳性疾病早期診斷、癌細胞基因檢測和基因突變研究的技術。 B型肝炎病毒以及C型肝炎和戊型肝炎病毒可以在患者中檢測到非常少量的病毒。
但是,由於它過於敏感,也容易因標本汙染而出現假陽性。
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DNA聚合酶以脫氧核苷酸三磷酸(DATP、DCTP、DGTP或DTTP,統稱為DNTPS)為作用物件,作用期為DNA複製期。
解旋酶靶向DNA雙鏈的氫鍵,作用期是DNA或RNA複製期。
RNA聚合酶在轉錄階段靶向四種核醣核苷酸三磷酸(NTP:ATP、GTP、CTP、UTP)。
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聚合酶鏈式反應(PCR)的基本原理是酶合成反應。 也就是說,在模板DNA、引物和脫氧核醣核苷酸存在下,DNA鏈在DNA聚合酶的作用下被擴增和延伸。
在實驗中,DNA雙螺旋的氫鏈被破壞,通過加熱解離成單鏈DNA,並變性。 然後,通過退火,突然冷卻使引物與其互補模板區域性形成雜交鏈; 然後,在DNA聚合酶、脫氧核醣核苷三磷酸底物和鎂離子存在下,在聚合酶的催化下,以引物為起點延伸DNA鏈。
延伸資料:PCR(聚合酶鏈式反應)是利用DNA在體外95°C的高溫下變性成單鏈,在低溫(通常在60°C左右)引物和單鏈根據鹼基互補的原理,然後調節溫度到DNA聚合酶的最佳反應溫度(約72°C), DNA聚合酶沿磷酸到五碳糖(5'-3')在互補鏈的合成方向上。基於聚合酶的PCR儀實際上是一種溫控裝置,可以在變性溫度、復性溫度和延伸溫度之間很好地控制。
反應特點:特異性強;
高靈敏度; 簡單快捷;
純度要求低。
RNA聚合酶:一種以鏈或RNA為模板催化核苷-5-三磷酸合成RNA的酶。 它是一種以 DNA 為模板,以三磷酸核醣核苷為底物,並通過磷酸二酯鍵聚合催化 RNA 合成的酶。 >>>More
從相對分子量小的化合物到分子量較大的有機高分子化合物的這種反應稱為聚合反應,而乙烯與聚乙烯等聚合反應也稱為加成聚合反應,稱為加聚反應。 >>>More