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抗性菌株不能在非抗性板上生長的原因是:
1.無抗生素平板是指不含任何抗生素的培養基,而耐藥菌株是具有抗生素耐藥特性的菌株,它們可以在含有抗生素的培養基上生長,但不能在不含抗生素的培養基上生長。
2.無抗生素板主要用於篩選靶基因或蛋白質,而耐藥菌株則在含有特定抗生素的環境中進行篩選。
3.在無抗生素平板上生長的微生物缺乏適當的代謝途徑或酶,無法利用特定的底物或生長因子,或缺乏其他必要的因子。
總之,耐藥菌株不能在無抗生素平板上生長,因為它們需要在含有特定抗生素的培養基上生長,而無抗生素平板上缺乏相應的生長條件。
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抗性在您的質粒上,菌株是非耐藥性的,菌株需要轉移到抗性質粒中才能在平板上生長。
做多個不長出的質粒轉化,你看,是這三個問題:
阻力有誤嗎? 有些是 kan,有些是 amp,看看你是不是放錯了板子。
轉化後的質粒是否降解,或者質粒不好,或者轉化操作是否有問題。
它不是乙個合格的細胞。
轉換效率太低,可以檢測到。
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雜菌太多,生長速度比你需要的菌株快,所以塗層需要用抗生素篩選。
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如果製備抗性板沒有任何問題,並且接種等測試步驟正常,則表明質粒尚未轉移到宿主細菌中。
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WOKE2008(聯絡ta)如果是非抗生素LB液體培養基,長時間不會是操作或培養基的問題(非抗生素一不小心就會被汙染,更別說細菌了); 如果它有耐藥性,那是因為你盤子上的單轉殖抗體是一種細菌,當你切換到抗性液體培養基時,它不會持續很長時間! 銀磊曙光(聯絡ta)沒有,我已經轉了好幾次了,介質沒有問題,因為沒有轉化的細菌生長。。如果平板是真菌,菌落形態看起來像大腸桿菌,沒問題,矽化,氨苄青黴素久了容易失效,對氨苄青黴素耐藥的大腸桿菌也會分解氨苄青黴素,所以應該用剛轉化的平板挑細菌,避免採摘衛星菌落wwllkkhh(站接觸ta)不要採摘菌落周圍的小斑塊(挑菌落的中心), 氨苄素長時間使用會失去抗藥性,建議盡早採摘細菌。
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我也遇到過這個問題,有兩種情況。
1.如果在轉化後出現,則取決於轉化後生長的菌落數量。 如果板上菌落密集,可能是氨苄素失效或部分失效(畢竟需要趁介質不定型倒板,加入氨苄素時溫度可能會高一點; 或者平板電腦存放時間過長)。如果平板上只有少數菌落零星生長,則可以將其視為細菌或無活性轉化體。
我個人認為固體氨苄素培養基的環境比液體氨苄素培養基的環境要好得多,這就是為什麼將長時間冷凍的細菌先鋪板活化的原因。
此時,建議重新反轉平板電腦或重新進行連線轉換。
2、我也遇到過篩選出來的靶菌在冰箱裡冷凍太久,復活的時候在盤子裡生長,但是在液體介質中繁殖極慢,基本時間不長的情況。
後來,我通過用儲存的質粒重新轉移到感受態細胞中解決了這個問題。
希望以上內容對您有所幫助。 我認為在實驗中找到原因很重要,但有時最好重新做一遍。 因為,許多不成功的結果都是由偶然因素引起的。
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首先,在確定所建議介質的電阻時是否存在問題? (阻力不對,就長不大)然後,接種環的酒精燈加熱滅菌後,是不是冷卻下來再取樣接種? (燙傷,鐵甲殖民地)。
那麼,樣品是否被噬菌體汙染了? (噬菌體導致細菌死亡)祝你好運。
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板材和液體介質是否耐受? 接種有問題? 液體介質不匹配? 什麼細菌? 什麼媒介?
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接種操作有問題嗎?
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描述不詳,大概是氧氣的問題**--
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