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多醣的吸光度通過酚硫酸法測定,優選在製備多醣溶液時離心,以除去雜質。 在提取多醣的過程中,還應考慮脫脂、色素的吸附和蛋白質的去除。 另外,我想告訴大家,苯酚應該重新蒸煮,因為苯酚容易氧化,時間長了就達不到顯色的目的(這一點很重要)。
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苯酚硫酸法測定多醣含量的步驟如下:
1.目的:測定蒽酮硫酸法無法測定的血清型工藝樣品的多醣含量。
2.方法原理:糖在濃硫酸的作用下水解生成單醣,並迅速脫水生成乙醛衍生物,然後與苯酚縮合形成橙黃色化合物,色澤穩定,在490nm的波長處,在一定濃度範圍內,其吸光度與多醣的含量成線性比例, 這樣就可以用分光光度計測定吸光度,用標準飢餓曲線定量測定型腔樣品的多醣含量。
3、主要實驗儀器及材料:濃硫酸、苯酚、蒸餾裝置、分光光度計、電子天平、坐標紙或計算機等。
注意:
1)該方法簡單、快速、靈敏、可重複,每粒糖只製作一條標準曲線,色澤持久。
2)應採用相應的標準多醣來製作標準線,如葡萄糖,應通過修正係數校正g的數。
3)對於雜多醣,可根據各單醣的組成比和主要成分單醣標準曲線的校正係數對分析結果進行修正計算。
4)測量時根據光密度值確定取樣量。所述光密度值優選介於兩者之間。 例如,如果小於2克,可以考慮在取樣時取2克,如果大於可以減半的試樣液,則仍取樣液。
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您好親愛的,根據您的問題:苯酚硫酸法是測定多醣含量的常用方法,其計算公式如下: 多醣含量(mg ml)=(吸光度值-空白對照吸光度值) 標準曲線的斜率 其中,通過製備具有不同濃度葡萄糖標準品的標準曲線來獲得標準曲線的斜率, 可用於計算待測樣品中多醣的含量。
需要注意的是,苯酚硫酸法測定多醣含量的結果受試劑質量、鑰匙操作精度、樣品性質等多種因素的影響,因此在進行實驗時應嚴格控制實驗條件, 並且實驗應重複多次,以獲得準高平衡和可靠的結果。
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澱粉和纖維素的組成單位是葡萄糖,但在植物多醣的情況下,種類和單位很多,多種單醣---果糖、半乳糖、木糖、甘露糖等都可以作為組成單位。 例如,銀耳多醣和香菇多醣極其複雜。
苯酚硫酸法師利用糖在濃硫酸的作用下水解生成單醣,並迅速脫水生成乙醛衍生物,再與苯酚縮合生成橙黃色化合物。 在490nm的波長和一定濃度範圍內,吸光度與多醣含量成線性比例,因此可以通過分光光度計確定吸光度,並通過標準曲線定量確定樣品的多醣含量。
此時,對於雜多醣,僅使用葡萄糖溶液作為標準曲線是不準確的。 有時採用多種單醣標準品作為標準曲線,但不同單醣標準品在相同濃度下的吸收值差異較大(葡萄糖顯色最大),單獨製作標準曲線時,雜多醣測定結果不同。 因此,苯酚硫酸法只能作為成分複雜的多醣的參考。
對於雜多醣,通常不採用單一苯酚硫酸法。 例如,氣相色譜法分析雜多醣的組成,結合苯酚硫酸法,可以得到更可靠的結果,比單獨使用苯酚硫酸法更可靠、更準確。
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原理:將醣類和硫酸加熱生成糠醛或糠醛衍生物,然後利用苯酚顯色,因為不同的糖可以得到不同的顏色,因此可以製作各種醣類的相應標準曲線,從而可以確定樣品中的醣類。
影響因素:應該沒什麼,只要把解決方案做好,跟著步驟,就沒有問題。
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苯酚硫酸法是測定多醣(如澱粉、歐芹等)含量的方法,多醣含量是通過比色測定耐多醣還原的苯酚和硫酸絡合物的吸光度來計算的。
當使用苯酚硫酸法測定多醣含量時,所獲得的結果以質量數的形式表示。 多醣的量通常以毫克或克為單位報告。 因此,苯酚硫酸岩石檢測法測定多醣含量的結果以質量為基礎表示。
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總結。 苯酚硫酸法是否要測定多醣的標準曲線3 9s。
我還是有點迷茫,你能更詳細一點嗎?
它不一定是 3 個 9,但曲線的準確性和可靠性會受到影響。 問題原因:1
樣品中不一致的多醣含量:樣品中不一致的多醣含量會損害曲線的準確性和可靠性。 2.
樣品中不一致的多醣種類:樣品中不一致的多醣種類會損害曲線的準確性和可靠性。 3.
樣品中不一致的多醣結構:樣品中的多醣結構不一致會損害曲線的準確性和可靠性。 解決方法:
1.盡量使用相同的多醣樣品,以保證平衡曲線的準確性和可靠性。 2.
盡量使用相同的多醣結構,以保證曲線的準確性和可靠性。 3.盡量使用相同的多醣含量,以保證曲線的準確性和可靠性。
個人提示:用公盤碗酸法測定多醣標準曲線時,應盡量使用相同的多醣樣品、相同的多醣結構和相同的多醣含量,以保證曲線的準確性和可靠性。
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