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目的。 殺死微生物並修復其細胞結構。
鑑定細胞細菌型別。
便於觀察和分析細胞細菌的致病性。
請求。 注意脫色時間,脫色是革蘭氏染色成功的關鍵,脫色不足會導致假陽性,過度脫色會導致假陰性。
對處於活躍生長期的菌株進行染色。
塗片不宜過厚,以免脫色不完全造成假陽性。
僅此而已嗎? 還是你寫測試報告,和你一開始寫的一樣?
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原理 結晶紫和碘溶液初次染色後,形成不溶於細胞壁的結晶紫和碘絡合物,革蘭氏陽性菌由於其細胞壁厚、肽聚醣網層和緻密交聯,因此當它們用乙醇或丙酮脫色時,由於失水而減少網孔, 而且不含脂質,所以在乙醇處理上不會有縫隙,所以結晶紫和碘絡合物可以牢牢地留在壁上,讓它仍然是紫色的;但由於其細胞壁薄,外膜層脂質含量高,肽聚醣層薄,交聯不良,以脂質為主的外膜在遇到脫色劑後迅速溶解,薄而鬆散的肽聚醣網路不能阻止結晶紫和碘絡合物的溶解,因此經乙醇脫色後仍為無色, 然後用沙黃等紅色染料復染,使革蘭氏陰性菌變紅。
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革蘭氏染色的意義如下:根據革蘭氏染色的性質,可以縮小細菌的鑑別範圍,有利於進一步鑑定細菌類別。 因此,可以對不同的疾病做出不同的診斷。
由於革蘭氏細菌對抗生素的敏感性也不同,因此革蘭氏染色對抗生素的選擇也有重要意義。
革蘭氏染色的原理革蘭氏染色。
其原理是革蘭氏陽性菌。
它在化學和生理性質上與陰性細菌有很大不同,染色體反應也不同。
複合物的結合力比較強,不易脫色,而陰性菌的結合力比較弱,容易脫色,是染色反應的主要依據。
參考以上內容:百科全書-革蘭氏染色。
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脫色時間的掌握是革蘭氏染色成敗的關鍵。 孝。
革蘭氏染色有四個基本步驟:結晶紫初級染色、碘液媒染染、乙醇脫色、砂黃復染,其中乙醇脫色是關鍵。 因為如果脫色過多,宴會可能會造成革蘭氏陽性菌的假陰性,如果脫色不充分,可能會使革蘭氏陰性菌出現假陽性。
革蘭氏染色是細菌學中廣泛使用的鑑別染色方法,通過盲結晶紫初染和碘液媒染染,在細胞壁上形成不溶於水的結晶紫和碘絡合物,革蘭氏陽性菌由於其細胞壁較厚,肽聚醣網層和緻密交聯,革蘭氏染色是一種復染方法,即 標本固定後,先用龍膽紫染色,媒染後用酒精媒染碘溶液媒染,再用紅復染。
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革蘭氏染色的步驟是:初染、去浮、媒染、脫色和復染。
1.固定:在無菌條件下,用接種環挑取少量細菌,塗在載玻片上。
2.去浮:用草酸銨結晶紫染色一分鐘,用水洗滌除去浮色。
3.媒染劑:媒染劑與碘-碘化鉀溶液浸泡一分鐘,倒出多餘的溶液。
4、脫色:用中性脫色劑脫色,革蘭氏陽性菌不褪色成紫色,革蘭氏陰性菌褪色成無色。
5、糠雀復染:30秒紅色染色液或砂黃復染,革蘭氏陰性菌仍無色,革蘭氏陰性菌呈紅色。
顯微鏡檢查:乾燥後,用油顯微鏡觀察。 革蘭氏陰性菌為紅色,革蘭氏陽性菌為紫色。 基於散落細菌的革蘭氏染色反應,密度過大的細菌往往會產生假陽性。
染料成分 :
鹼性染料:這在簡單的染色中已經討論過,這裡用結晶紫。
媒染劑:其作用是增強染料與細菌的親和力,更好地加強染料與細胞的結合。 常用的媒染劑是碘溶液。
脫色劑:幫助染料對被染色的細胞進行脫色。 細菌的區別在於染料脫色的不同難度。
革蘭氏陽性菌不太容易被劣質脫色劑脫色,而革蘭氏陰性菌則容易脫色。 常用的脫色劑是prochloride或乙醇,這裡使用的是95%的乙醇。
復染液:也是一種鹼性染料,其目的是用另一種顏色重新染色脫色的細菌,以便與未脫色的細菌進行比較。 這裡使用藏紅花的水溶液。
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革蘭氏染色。
一般包括初級染色、媒染染色、脫色、復染等四個步驟,具體操作方法有:
1)塗片固定。
2)草酸銨結晶紫染色1分鐘。
3)用蒸餾水沖洗。
4) 蓋上碘溶液約1分鐘。
5)用清水清洗,用吸水紙吸水。
6)加入幾滴95%酒精,輕輕搖晃脫色,20秒後用清水洗滌吸水。
7)櫻桃棗用紅色染色液(稀釋)染色1分鐘後,用蒸餾水沖洗。乾燥,顯微鏡檢查。
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革蘭氏染色。
一般包括初級染色、媒染染色、脫色、復染四個步驟。 結果:革蘭氏陽性菌。
它是藍紫色的,革蘭氏陰性。
顏色為紅色。 革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌在化學成分和生理性質上存在許多差異,染色反應也不同。 現在人們普遍認為,革蘭氏陽性菌含有核蛋白、鎂鹽和多醣的特殊複合物。
它與碘和結晶紫有關。
複合物結合力很強,不易脫色,陰性細菌複合物結合在底部,吸附染料。
性差,易脫色,是染色反應的主要依據。