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在組織培養過程中,離體細胞對任何有毒物質都敏感。 有毒物質包括崩解的微生物和細胞殘留物,以及非營養性化學物質,因此應嚴格清潔和消毒新的和重複使用的培養皿等培養用品。 Creature Gang 在那裡有乙個介紹,我在那裡看過,你可以看看。
儀器、材料和試劑] 1儀器:潔淨工作台、烘箱、高壓鍋、過濾器。
2.材質:UV燈、微孔膜。
3.試劑:75%酒精,新蓋爾芬,高錳酸鉀,重鉻酸鉀,濃硫酸。
浸泡:新購的玻璃器皿常有灰塵,呈弱鹼性,或含有鉛、片等有害物質,用自來水浸泡一夜,用清水洗淨,再用2%5%鹽酸浸泡過夜或煮沸30min後用清水洗淨。 基本會話:
栽培後,應立即將玻璃器皿浸泡在清水中,以便順利進行下一次刷洗工作。 玻璃器皿使用後往往會附著大量蛋白質,乾燥後不易刷掉,使用後應立即用水浸泡。 刷牙:
使用軟毛刷和優質清潔劑刷掉餐具上的雜質,沖洗乾淨並晾乾。 要點:浸泡玻璃器皿後,用刷蘸洗滌劑去除器皿上的雜質,刷過多次會破壞器皿的表面光潔度,而且洗滌劑有增加pH值的趨勢,所以很容易選擇軟刷和優質的洗滌劑。
禁止使用去汙粉。 因為它含有沙粒。 它會對玻璃器皿的表面造成嚴重破壞。
特別注意瓶子的角落。 酸浸泡前沖洗洗滌劑。 酸洗:
將器皿浸泡在清潔液中 24 小時,如果緊急使用,則不少於 4 小時。 清洗液由重鉻酸鉀、濃硫酸和蒸餾水配製而成,氧化作用強,去汙能力強。 浸泡在清洗液中後,可以完全去除玻璃器皿留下的微量雜質。
漂洗:先用自來水充分沖洗,用吸管沖洗10min,每瓶灌滿倒出,重複10次以上。 然後用蒸餾水沖洗 3 次,不留死角。
晾乾或烘乾以備後用。 對於已經使用過的器皿,所有被汙染的器皿必須煮沸30min或用3%鹽酸浸泡過夜,未被汙染的器皿不需要消毒,但仍需刷洗,清洗液浸泡過夜,漂洗等。 清洗液的配製及使用注意事項1
清洗液(配方見表2-1): 成分:弱酸、亞強液、強液、重鉻酸鉀(g)、水(ml)、濃硫酸(ml)、硫酸濃度(v)、501000908%、100100016014%、6020080080% 建議使用耐酸塑料桶或不鏽鋼桶。 首先,將重鉻酸鉀溶解在水中(用玻璃棒攪拌溶解,有時不完全溶解)。 慢慢加入濃硫酸,不要過分衝動,否則會產生熱量,造成危險(切勿將重酸餌倒入濃硫酸中)。
清洗液製備時呈棕紅色,變綠時表示失敗。 由於清潔液具有極強的腐蝕性,因此在準備和使用清潔液時必須小心並加以保護。
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它太高階了,無法理解。 硬!
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通常,細胞培養室用於無菌實驗室。
配製過氧乙酸作為消毒劑。 實驗室有84或捷爾迪作為消毒劑。
實驗室內安裝紫外線燈。 保險箱裡也應該有紫外線。 如果你沒有,你可以買乙個手持式的。 實驗室完成後,開啟紫外線輻射半小時。 如果覺得有必要,也可以用甲醛燻蒸一天。 這個比較麻煩。
實驗室裝置櫃檯放置。
將實驗中使用的移液器頭、注射器、廢液直接扔進安全櫃中的過氧乙酸中,浸泡半小時後丟棄。
能用到病毒的器皿必須包好(一般不用槍,盡量不要碰病毒液),安全櫃必須拆下並熄滅。
讓我們做乙個更大的高壓滅菌器。 否則,你會死得很痛苦。
垃圾是專門收集的。 如果物流無法處理,則應自行消毒並丟棄。
實驗必須在 2 級或更高階別的安全櫃中進行。 在下面用更多的稻草紙製作它。 如果你有條件,你可以墊鋁箔什麼的,那是不透水的。
實驗室嚴格控制人員流動!! 那些可以接種疫苗的人可以接種疫苗。
穿防護服保護自己免受傷害,也是在保護他人!!
另外,不要戴著手套走出實驗室!
詳情請參閱國外生物安全實驗室的規章制度。 按照自己的條件實施。
在下面的拙見中。
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樓上提到的方法大體上是正確的,但如果使用過氧乙酸進行消毒,會造成細胞間裝置的很大程度的腐蝕。 目前比較流行的是幹霧雙氧水消毒技術。
採用世界先進的歐菲姆氧氧-30000乾式霧化雙氧水消毒機,源自歐盟GMP設計,本身滿足潔淨區淨化要求,不帶入任何外部汙染的同等塌陷滲入高效潔淨室空間微生物,達到無菌淨化的目的,已廣泛應用於國內生物製藥企業, 前100家製藥公司中有70%正在使用Orpheum oxy-30000乾式霧化過氧化氫消毒機,因此,它具有經過驗證的驗證方案,其優點包括:
採用諾福德消毒液,殺菌效果好,對嗜熱脂肪桿菌孢子有6個對數殺滅率,可殺滅支原體、真菌、病毒、孢子等200多種微生物,無色無毒無殘留,安全可靠,對人員友好;
效能穩定,非電加熱原理,降低高溫易損壞裝置的風險;
驗證資料齊全,滅菌裝置及使用的試劑均在國內備案,有CANS認證檢測報告;
裝置體積小,操作方便,移動靈活,滿足不同空間需求。
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清洗植物組織培養中使用的各種玻璃器皿,特別是培養瓶和盛有培養基的容器,必須嚴格清洗,防止油脂、重金屬離子、酸、鹼等有害物質殘留在瓶內,影響培養物的生長。 用過的玻璃器皿應及時清洗,先倒出培養基和培養物等汙垢,然後浸入水中,然後清洗。 玻璃器皿的洗滌可以根據器皿汙染的程度和性質以不同的方式進行,通常是鹼性洗滌和酸洗。
所有被微生物汙染的器皿必須高壓滅菌和煮沸才能殺死細菌,否則孢子會飛揚,汙染環境,給組織培養帶來嚴重困難。 器皿洗淨後,應晾乾或晾乾,並放置在指定的地方,方便取用。
常用的殺菌方法可分為兩大類:物理方法如乾熱(烘烤和燃燒)、濕熱(常壓或高壓蒸煮)、輻射處理(紫外線、超聲波、微波)、過濾、清洗和大量無菌水沖洗等措施; 化學方法是使用汞、甲醛、雙氧水、高錳酸鉀、來蘇爾、漂白粉、次氯酸鈉、抗生素、醇類化學品。 這些方法和藥劑應根據工作中的不同材料和不同用途適當選擇,濕熱滅菌(培養基)介質應在製備後24小時內完成。
高壓滅菌針對的是無菌水、培養基、接種用具等,可以延長滅菌時間或增加壓力。 介質應嚴格遵守保溫時間。 一些布製品,如實驗室外套、口罩等,也可以高壓滅菌。
洗滌乾燥後,用高壓塑膠袋包裝,高壓滅菌器20-30min。
燒灼(無菌操作器械) 在無菌操作過程中,將鑷子、剪刀、手術刀等浸入95%的酒精中,並在使用前從酒精燈的火焰中除去火細菌。 冷卻後,立即使用。
乾熱滅菌(玻璃器皿和耐熱器具)。
過濾滅菌(非耐熱物質) 一些生長調節劑如赤霉素、玉公尺素、脫落酸和某些維生素不耐熱,不能用高壓滅菌處理,通常使用過濾滅菌方法。
細胞培養汙染通常是細胞培養實驗室中最常見的問題,有時可能會造成嚴重後果。 細胞培養汙染物主要有兩大類,一類是化學汙染物,如:培養基、血清和水中的雜質、內毒素、增塑劑和洗滌劑,另一類是生物汙染物,如: >>>More
不,細胞會死,並沒有真正意義上的永恆死亡,而是癌細胞就是所謂的永不死亡的細胞,而且因為繁殖快,所以細胞膜上的醣蛋白減少了,所以沒有接觸抑制,可以無線繁殖,但不是不朽的。