諮詢MDCK細胞的培養

細胞培養汙染通常是細胞培養實驗室中最常見的問題，有時可能會造成嚴重後果。 細胞培養汙染物主要有兩大類，一類是化學汙染物，如：培養基、血清和水中的雜質、內毒素、增塑劑和洗滌劑，另一類是生物汙染物，如：

細菌、黴菌、酵母菌、病毒、支原體和其他細胞系的交叉汙染。 雖然汙染不能完全消除，但通過充分了解汙染源和良好的無菌技術，可以降低汙染的頻率和嚴重程度。 細菌是一大類廣泛存在的單細胞微生物。

細菌的直徑通常只有幾微公尺，有多種形狀，如球形、棒狀和螺旋形。 由於其分布廣泛、生長迅速和大小，細菌與酵母和黴菌一起構成了細胞培養中最常見的汙染物。

一旦培養物被細菌汙染，幾天內即可通過簡單的目視觀察檢測到; 感染的培養物通常是渾濁的（即渾濁的），有時被薄膜覆蓋。 此外，培養基的pH值突然下降的情況並不少見。

細菌是在低倍顯微鏡下在細胞之間移動的微小顆粒，在高倍顯微鏡下觀察時可以辨別出每種細菌的形狀。 酵母是真菌界中的一種單細胞真核微生物，大小從幾微公尺（常見）到 40 微公尺（罕見）不等。 與細菌汙染類似，酵母汙染後培養物會變得渾濁，尤其是在汙染的後期。

當被酵母汙染時，培養物的pH值變化很小，只有在汙染嚴重時才會增加。 在顯微鏡下，酵母表現為單個橢圓形或球形顆粒，有些出芽產生較小的顆粒。 黴菌是真菌界中的一種真核微生物，以稱為菌絲的多細胞細絲的形式生長。

這些多細胞細絲形成乙個基因相同的細胞核交聯網路，稱為菌落或菌絲體。 與酵母汙染類似，培養物的pH值在黴菌汙染開始時保持穩定，並隨著汙染的增加而迅速上公升，導致培養物渾濁。 在顯微鏡下，菌絲體通常表現為細小的纖維束，有時表現為密集的孢子團塊。

許多種類的黴菌的孢子在休眠期間對極其惡劣、惡劣的環境具有抵抗力，只有當它們暴露在合適的生長條件下時才會被啟用。

首先，讓我們談談MDCK細胞。

MDCK 成立於 1958 年 9 月，是在 Cox 的 Banny 腎臟中開發的，該腎臟在原代培養過程中的形態類似於成纖維細胞，並通過胰蛋白酶和 EDTA 混合消化物的 6 次連續消化純化成上皮樣細胞，每次純化間隔 7 天。 培養的MDCK細胞具有遠端腎小管和集合管的分化特徵，**細胞。 MDCK細胞系中至少有兩種細胞型別，一種名為C5A，當在含有I型膠原蛋白的培養物中生長時，它會分泌液體，從而導致囊腫形成，但當在塑料面的低材料上培養時，它會分泌液體，但不會形成囊腫，而另一種細胞則相反。

細胞的用途：

MDCK細胞被廣泛用作遠端曲縮小管或集合管的模型，也可用於代謝研究和PG水平的藥物相互作用研究，以及觀察流感病毒株對細胞功能的影響。

對於細胞培養，有的使用DMEM培養基，有的使用MEM培養基，培養某種型別的細胞沒有固定的培養條件。 在MEM中培養的細胞在DMEM或M199等培養基中可能同樣容易生長。 所以我認為你可以隨心所欲地選擇。

我以前更喜歡DMEM媒體。

4.高糖DMEM和低糖DMEM的區別在於：

高糖DMEM的葡萄糖含量為，低糖DMEM的含糖量為，其中低糖DMEM的含糖量與普通培養基相同，因此可以與其他普通培養基一起使用，而高糖DMEM主要用於腫瘤等特殊細胞的培養， 而如何選擇，則需根據要求確定。我建議您使用低葡萄糖DMEM培養基。

5.胎牛血清最好用於血清，如果不使用，也可以使用小牛血清。 胎牛血清**有點貴。