我想問一下免疫組化是否必須使用與實驗動物相同物種的抗體

發布 健康 2024-05-27
13個回答
  1. 匿名使用者2024-02-11

    不。 由於同一動物的細胞表面存在不同型別和數量的抗體受體FCR,因此當您選擇來自同一動物的抗體作為一抗時,可能會產生非常強烈的非特異性訊號。

    如果檢測到人類的某種抗原分子,可以選擇小鼠抗人抗體作為一抗,然後可以選擇兔抗小鼠抗體作為二抗。 一抗選擇能夠識別您要標記的動物的物種,並且通常不會產生與您要標記的動物蛋白相同的物種。

    選擇對您具有特異性的一抗。

    例如,如果要標記特定蛋白質,首先要購買可以標記該蛋白質的一抗,物種不限,但必須能夠識別要標記的物種的蛋白質。 如果要標記大鼠肌動蛋白,那就買一種識別大鼠肌動蛋白的抗肌動蛋白一抗(它也可能識別其他動物,這個沒關係),一般是**常見的動物,如兔、馬、羊等。

    如果要問抗大鼠肌動蛋白是否可以用於標記小鼠肌動蛋白,這並不是絕對不可以的,該抗體可能在不同物種中具有一定的交叉反應性。 但沒有人能保證這種效果。

    其次,如果選擇與實驗動物同種的一抗,那麼用於連線一抗的二抗必須是針對動物的IgG,然後它就會與樣本的其他蛋白質結合,因為二抗是物種特異性的,所以背景會很高。

    如果你想購買商業抗體,你可能不會購買你提到的一抗。

  2. 匿名使用者2024-02-10

    免疫螢光也是組織切片,這應該也是可能的,與免疫組化相比,但二抗不同。

    對於免疫螢光,單轉殖抗體和多轉殖抗體都是可以接受的,單轉殖抗體通常是首選。

  3. 匿名使用者2024-02-09

    不可以,因為免疫螢光和免疫組化中使用的切片一般不同,乙個是冰凍切片,乙個是石蠟切片,所以切片上靶蛋白的修飾程度不同,所以在很多情況下不能普及。

    免疫螢光技術又稱螢光抗體技術,是最早的標記免疫技術之一。 它是一種建立在免疫學、生物化學和顯微鏡技術基礎上的技術。 長期以來,一些學者試圖將抗體分子與某些示蹤物質結合,並利用抗原-抗體反應將抗原物質定位在組織或細胞中。

    免疫組化是應用免疫學的基本原理——抗原-抗體反應,即抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑(螢光素、酶、金屬離子、同位素)顯色,測定組織細胞中的抗原(肽和蛋白質),並對其進行定性和定量的定位研究, 這叫做免疫組化或免疫細胞化學(immunocytochemistry)。

  4. 匿名使用者2024-02-08

    免疫螢光和免疫組化中使用的切片一般不同,乙個是冷凍的,乙個是石蠟的,所以切片上靶蛋白的修飾程度不同,所以在很多情況下不能普遍化。 Qi's Biotech建議,如果它們可以通用,哪家公司的抗體說明書仍然區分IF和IHC,那麼將它們全部寫下來不是更好嗎? 因此,在選擇抗體時,必須在“用途”欄中找到所需的具體用途。

  5. 匿名使用者2024-02-07

    一般抗體手冊都有詳細的介紹,建議您仔細閱讀說明書或諮詢賣家。

  6. 匿名使用者2024-02-06

    親愛的,你不能做免疫組化。

  7. 匿名使用者2024-02-05

    我個人認為應該可以,但建議你諮詢齊氏生物科技,這樣更可信、更可靠。

  8. 匿名使用者2024-02-04

    最好買寫免疫組化來做。

    否則,沒有訊號。

    或非特異性訊號。

    你怎麼知道是抗體問題還是中間問題?

    而且做免疫組化是相當費力的。

    當你必須這樣做時,只要把事情準備好。

  9. 匿名使用者2024-02-03

    蛋白質是你自己提取的,比如給藥後取出血清,然後準備真誠的蛋白質樣品,用抗體來觀察你的作用結果。 你需要區分什麼? 我不明白你的意思。

  10. 匿名使用者2024-02-02

    是的,這兩者在概念上是一種技術,你說的是細胞爬行和組織切片可以使用相同的抗體,原理是一樣的,但要注意一抗的稀釋,以及切片,注意新鮮材料的固定,以確保你組織中的蛋白質不被分解, 否則,抗原不變性或變性,無法識別抗體。

  11. 匿名使用者2024-02-01

    免疫組化實驗中常用的抗體有單轉殖抗體和多轉殖抗體。 據我所知,腫瘤自體免疫細胞技術中使用的都是細胞因子和腫瘤細胞抗原。

  12. 匿名使用者2024-01-31

    在免疫組化中用與二抗同源的非免疫動物血清阻斷的目的是減少非特異性結合。 如果用小鼠血清封閉標本,血清中可能含有您正在檢測的目標蛋白,然後一抗會與其結合並干擾結果。 而如果用羊血清進行阻斷,則不會達到阻斷的目的,即即使阻斷血清與一些非特異性位點結合,但因為是綿羊,二抗也會與之結合,然後會出現假陽性結果!

    因此,最好用與二抗來源相同的正常動物血清進行阻斷。

  13. 匿名使用者2024-01-30

    乙個就夠了,不在於實驗方法的數量,而在於文章是否實質性,如果指標比較實質性,比如同時研究受體和配體,或者同時監測乙個訊號通路中的多個上下游指標等,只做免疫組化,投資國內核心,問題不大。 如果指示器很薄,您可以新增 WB 或 PCR。

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