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流式細胞儀的構造和工作原理。
流式細胞儀主要由以下五個部分組成:流室和流動驅動系統、雷射光源和光束形成系統、光學系統、訊號檢測和儲存、顯示和分析系統、細胞分選系統。
流動室和流體驅動系統。
流式室是流式細胞儀的核心,由石英玻璃製成。 單細胞懸浮液通過流室中一定孔徑的孔被細胞流道中的鞘液包圍,檢測區域位於孔的中心,細胞與雷射垂直相交,細胞在鞘液的約束下通過雷射檢測區域排列成單排。
雷射光源和光束成形系統。
常用的雷射管是氬離子氣體雷射管,其發射的光波長為488 m,也可配備氦氖離子氣體雷射管(波長633 m)或紫外雷射管。 雷射光源和流室之間有兩個柱面透鏡,它們將雷射光源發出的具有圓形橫截面的雷射束聚焦成具有小橫截面的橢圓形雷射束(22 m 66 m),使通過雷射檢測區域的細胞的照射強度一致。
訊號儲存、顯示、分析系統。
流式細胞儀的光學系統由幾組透鏡、小孔、濾光片組成,大致可分為兩組:流室前部和流室後部。 流室前面的光學系統由透鏡和小孔組成,透鏡和小孔將來自雷射光源的圓形截面雷射束聚焦成小截面的橢圓形雷射束,使通過雷射檢測區域的細胞的照射強度一致,雜散光的干擾最小化
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流式細胞儀是一種自動分析和分選細胞的裝置。 它可以快速測量、儲存和顯示懸浮在液體中的分散細胞的一系列重要的生物物理和生化特徵引數,並可以根據預先選擇的引數範圍從中挑選出特定的細胞亞群。 大多數流式細胞儀是零解像度儀器,只能測量細胞的總核酸和總蛋白的量,而不能識別和測量特定部位的核酸或蛋白量。
也就是說,它的細節解像度為零。 流動室由樣品管、鞘液管和噴嘴組成,通常由光學玻璃、石英等透明穩定的材料製成。 經過精心設計和製造,它是流體系統的核心。
樣品管儲存樣品,在液體流動壓力的作用下,單細胞懸浮液從樣品管中噴出; 鞘液從四面八方從鞘管流向噴嘴,包圍樣品的周邊並離開噴嘴。 為了保證液體流動穩定,液體流動速度一般限制在<10m s。 由於鞘液的作用,被測細胞被限制在流體流動的軸線上。
流動室配有壓電晶體,當暴露於振盪訊號時會振動。
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流式細胞術是基於流式細胞術,可以快速準確地對單個細胞的理化性質進行定量和分類。 分析過程如下:製備單細胞懸浮液,用特異性螢光染料標記的抗體染色,染色後待測細胞在一定氣體壓力下壓入流室,細胞在鞘液包裹下排列成單排,依次通過檢測區, 細胞在雷射束的照射下會產生散射光和激發螢光。
兩個訊號同時由光電倍增管(PMT)接收。 接收後,可以將其轉換為電訊號,並通過模數轉換器將連續的電訊號轉換為可被計算機識別的數碼訊號進行分析。
如上所述,流式細胞儀由流體系統、光路系統、檢測分析系統三部分組成,有的儀器還具有分選功能,可以對顆粒進行充能和偏轉,實現細胞分選。
流流系統:通過產生壓力使含有目標細胞的樣品迅速進入儀器,利用樣品與鞘液之間的壓差在封閉的樣品管中收集樣品進入光學分析系統;
光路系統:不同雷射器發出的雷射照射到細胞表面產生光訊號,然後被不同的光路系統接收。 在流式細胞術照射室的分析點,雷射散射折射到細胞表面,發出包括正向散射光(FSC)和側散射光(SSC)在內的散射光,激發細胞表面的螢光素發出螢光。
前向散射光和側向散射光探測器收集散射光並將其轉換為電訊號; 螢光由聚光器收集,不同顏色的螢光通過雙色反射器轉向不同的光電倍增檢測器,也將螢光訊號轉換為電訊號。 FSC 和 SSC 是流式細胞術中兩個非常基本的引數。 FSC的值可以表示電池的大小,電池的體積越大,FSC越大。
SSC代表細胞的粒度,細胞內細胞器和粒度越大,SSC越大。
檢測分析系統:螢光訊號的強度代表細胞膜表面抗原的強度或細胞內物質的濃度,將光訊號轉換為計算機可以識別的電訊號。 計算機處理和分析測量的各種訊號。
流式細胞術分選是在流式細胞術的基礎上進行的。 超高頻壓電晶體放置在流動室的噴嘴上方,它產生振動,使噴射的液體流形成均勻的液滴,待測細胞分散在其中。 這些液滴帶正電荷和負電荷(用螢光素標記的細胞液滴帶負電荷; 未用螢光素標記的細胞液滴帶正電; 不含細胞的液滴不帶電),當液滴流過偏轉板時,它們被高壓電場偏轉並落入各自的收集容器中,未帶電的液滴落入廢物容器中,從而實現細胞分離。
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我簡單說一下。
白小子:
1.首先,機器吸走了du
細胞懸液,注射至zhi
它由鞘液(通常為磷。
DAO 酸緩衝液)。
由於鞘液的流速較大,屬於通過軸向流動的細胞懸浮液形式,一般為單細胞佇列的形式。
2.然後細胞通過檢測視窗。 有雷射束照射。 通常,對細胞進行螢光染色,並用雷射照射後,產生不同波長的激發光。 該機器配備了乙個檢測器,用於檢測激發光的強度。
3.根據激發光的強度,確定細胞與色物質的結合,從而獲得待檢測的結果(如抗原量、DNA量等)。
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奈米流白
該檢測器可以實現單個DU奈米顆粒(7-1000 nm)的粒徑和分布、顆粒DAO濃度和生物化學。
對內部性狀具有高靈敏度和高選擇性。
電容式和高通量檢測將成為生命科學、奈米科學和奈米技術研究的強大表徵工具。 奈米流檢測器是基於鞘流單分子螢光檢測技術開發的先進的單顆粒、多引數、高通量奈米顆粒定量表徵平台,對單個低折射率奈米顆粒的散射檢測具有前所未有的24nm靈敏度,具有靈敏度高、速度快、物理生化性質同時檢測等優點, 和懸浮檢測。
優點:檢測靈敏度:散射檢測24nm低折射率奈米顆粒,螢光檢測單個藻紅蛋白。
奈米顆粒(<100 nm)多引數定量表徵流式細胞術裝置。 檢測範圍覆蓋外泌體的整個粒徑(30-200 nm)。
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一般都有使用者指南,請按照說明使用。
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這是分析資料時柱形圖的設定。
最大縮放是指比較多個柱形圖的峰值,比較短峰值與最高峰值之間的比例關係。 y 軸現在不再是單元格計數,而是百分比。
它是一種利用生物技術和生物製劑,將體外從患者體內收集的免疫細胞培養和擴增,然後將其輸回患者體內,以刺激和增強身體的自身免疫功能,從而達到最佳目的的方法。 >>>More
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