通過薄層色譜法分離葉綠體色素怎麼樣？ 20

你想知道這些步驟嗎？

1.提取綠葉中的色素。

1.稱取綠葉5克，切成小塊，放入研缽中。

2.在研缽中加入二氧化矽和碳酸鈣，加入無水乙醇10ml，快速研磨。

3.將漿料倒入玻璃漏斗中（在漏斗底部放一塊單層尼龍布）進行過濾。 將濾液收集到試管中，及時用棉塞將試管塞緊。

2.準備濾紙條。

切掉濾紙條一端的兩個角，用鉛筆在距此端 1 厘公尺處畫一條細的水平線。

3.畫一條細線的濾液。

用毛細管移液管吸出少量濾液，並沿著鉛筆線均勻地畫一條細線。 濾液乾燥後，抽取一兩次。

4.分離綠葉中的色素。

將3ml色譜法倒入試管中，輕輕將濾紙條（濾液管端朝下）插入色譜儀中，然後用衛生棉條將試管口塞緊。 注意：不要讓濾液濾液管路接觸層析。

5.觀察和記錄。

觀察管內濾紙條上是否存在幾個顏料帶，以及每個顏料條帶的顏色。

濾光片條上從上到下有四個不同寬度和顏色的色帶：橙黃色胡蘿蔔素、黃色葉黃素、藍綠色葉綠素 a 和黃綠色葉綠素 b

實驗失敗的原因可能有很多，例如在顏料分離過程中沒有讓色譜法到達濾液管線。 否則，色譜法會使色素溶解在濾液細線中，使其進入燒杯中的色譜法，結果色素分離失敗。

1、分離原理：紙色譜法是以極性相似和溶解原理為基礎，以濾紙纖維的結合水為固定相，以有機溶劑為流動相。 由於樣品中每種物質的分配係數不同，擴散速度不同，從而達到分離的目的。

2、萃取原理：用有機溶劑萃取，再經過濾、真空濃縮和真空乾燥精製而得最終產品。 用於提取顏料的溶劑根據顏料的性質和所用的原料有不同的選擇，常用的是水、酸鹼溶液、有機溶液，如乙醇、丙酮、烷烴、苯等、油和二氧化碳。

顏料的作用：葉綠體中的色素分為兩類。 一種是可以吸收和傳輸光能的色素，包括大部分葉綠素a、所有葉綠素b、所有胡蘿蔔素和葉黃素。

另一類是少量處於特殊狀態的葉綠素a，它不僅可以吸收光能，還可以轉換光能，即將光能轉化為電能。 因此，合成葉綠體色素的作用是吸收、轉移和轉換光能。

1.提取：綠葉中的顏料-研磨法。 稱重並切下 5 克葉子，然後將它們放入研缽中。 加入少許二氧化矽。

碳酸鈣，5毫公升丙酮。

快速徹底研磨。

根據葉綠體。

有機溶劑（乙醇）中的顏料。

丙酮等），顏料可以用丙酮從葉子中提取（如果使用95醇作為溶劑，應在顏料提取物中加入無水碳酸鈉，以除去顏料提取物中的水分。

若以丙酮為溶劑，用量不宜過多，2 5ml為宜，過多會影響色素濃度，過少不易過濾），過濾後收集濾液，將濾液收集到乙個小試管中，及時用衛生棉條將試管塞緊，以備後用。

2.分離：準備濾紙條，將乾燥的定性濾紙切成6cm lcm的條狀，一端切掉兩個角，用鉛筆從lcm末端畫一條很細的水平線。 用毛細管移液管抽取少量濾液，沿鉛筆線均勻地畫一條細而直的濾液線，乾燥後重複畫2 3次（次數越多，顏料越多）。

實驗原理：

1、色素提取原理：顏料溶於有機溶劑而不溶於水，可採用乙醇、丙酮等95%有機溶劑溶解顏料，從而提取綠葉中的色素。 顏料提取也可通過水浴加熱提取，即將葉子切下放入95%乙醇中進行防水加熱。

一般來說，當葉子被加熱到黃白色時，葉子中的色素基本上被提取出來。

2.顏料分離原理：各種顏料在色譜溶液中的溶解度。

相比之下，高溶解度的色譜溶液在濾紙上的擴散速度更快，反之亦然，使各種顏料相互分離。

在葉綠素提取和彎曲分離實驗中，色帶重疊的原因可能有以下幾點：

1.在提取過程中，綠葉的研磨不充分，導致葉綠素沒有得到充分釋放。

2.研磨綠葉時，加入過多的碳酸鈣，使色素提取物不含或含有很少的葉綠素，導致葉綠素不能完全分離。

3.在實驗過程中，色譜法沒有正確點樣，因此不同的色素沒有被分離出來。

4.在實驗過程中，沒有用濾紙正確進行分離，使不同的埋藏顏料混合在一起。

5.在實驗過程中，濾條上的濾液線被色譜法溶解，導致色素帶重疊。

為防止色帶重疊，可以採取以下措施：

1.適當的研磨和葉綠素釋放操作。

2.正確的輥數控制了新增到研磨過程中的碳酸鈣量。

3.正確的分配和分離。

4.適當控制濾帶上的濾液管路不被層析溶解。

濾紙條上顏料的重疊現象是由於拉絲時濾液線沒有乾燥，使拉出的濾液不能滿足細度和均勻性的要求，從而使顏料擴散不一致，發生顏料重疊。

還應注意的是，松渡燕的色譜液不隨濾液的細紋分散，顏料會溶解在色譜溶液中，不會出現色素帶。

濾液細線不直！ 卜亮！！

絕對！ 凱腔！

為什麼濾液管路要直？ 為什麼要重繪幾次？

是為了防止顏料帶的種類和寬度重疊; 增加顏料的量，使顏料帶變暗。

從綠葉中提取和分離色素的方法如下：

漿料快速倒入，使用衛生棉條，因為研磨中加入丙酮，易揮發，丙酮用於溶解葉綠體中的色素，因為葉綠素可以溶解在丙酮中。 因為葉子的研磨有殘留物。

色譜法是一種高度脂溶性的有機溶劑。 色素在葉綠素體內的溶解度不同：色譜的高溶解度隨色譜溶液迅速擴散;

低溶解度隨濾紙上的色譜法緩慢擴散。 葉黃素是從胡蘿蔔素中提取的二醇，不能用鹼皂化，可以分離葉綠素和類胡蘿蔔素。

當通過紙層析分離葉綠體中的色素時，所得的濾條應有四個色素帶，從上到下，胡蘿蔔素。

橙黃色）、葉黃素。

黃色）、葉綠素 a（藍綠色）、葉綠素 b（黃綠色）所以它是葉綠素 b，所以選擇：b

從綠葉中提取和分離光合色素。 本課程的主要目的是讓學生掌握“實驗綠葉中色素的提取和分離”的實驗原理、方法和步驟以及實驗結果的分析，從而提高學生的自學能力。

設計理念為了讓學生在短時間內掌握實驗，我直接切入主題，引導學生一步步了解實驗的原理和方法，並設計了幾個關鍵問題，以提高後悔的學生的思維能力，然後分析實驗結果。

綠葉中色素的提取和分離是葉綠素b。

溶解度影響擴散速率，溶解度高，擴散速率快，胡蘿蔔素溶解度最高，其次是葉黃素，然後是葉綠素a，葉綠素b，所以色素帶從上到下是這樣排列的。 顏料帶的寬度是所代表的顏料的數量，不涉及溶解度。

在四種色素中，葉綠素a最豐富，因此最寬，其次是葉綠素b，然後是葉黃素和胡蘿蔔素，色素帶的寬度和寬度不同。

化學性質：

高等植物的葉綠體中有兩種主要型別的葉綠素：葉綠素 a 和葉綠素 b。 它們不溶於水，而溶於乙醇、丙酮、乙醚、氯仿等有機溶劑。 葉綠素分子式：

c55h72o5n4mg；葉綠素b分子式：C55H70O6N4MG

在顏色上，葉綠素 a 是藍綠色的，而葉綠素 b 是黃綠色的。 從化學上講，葉綠素是葉綠素的酯，經過皂化。 葉綠素是一種二羧酸，其中乙個羧基被甲醇酯化，另乙個被葉醇酯化。