MS培養基的注意事項，MS培養基的配方

1.母液和母液的製備方法如下：稱取每份母液中的幾種組分後，用少量蒸餾水充分溶解，然後混溶，最後將體積固定為1公升。

2.母液的製備方法如下：將稱好的Feso4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分別放入450ml蒸餾水中，加熱時不斷攪拌溶解，然後將兩種溶液混合，調節pH至，最後將體積設定為1L，並儲存在棕色玻璃瓶中。

在MS培養基中也加入2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D）和萘乙酸（naa苄基嘌呤（6BA）等植物生長調節劑，分別製備母液（0 1 mg ml）。 其製備方法如下：稱取這三種物質各10mg，用少量（1ml）無水乙醇預溶解2,4-D和NaA，用少量（1ml）濃度為molL的NaOH溶液溶解6BA，溶解過程需在水浴中加熱， 最後將體積分別設定為100ml，即得質量濃度為0 1 mg ml的母液。

4.組織培養的成功主要取決於培養基的選擇。 不同的培養基具有不同的特性，適用於不同的植物種類和接種材料。

在進行組織培養專案時，了解和分析各種培養基非常重要，以便您可以選擇合適的培養基。 組織培養中使用的培養基一般包括基礎培養基和激素，但植物激素的種類和數量隨著培養階段的不同和材料的不同而變化，因此植物激素不包含在每種培養基的配方中。 除MS培養基外，還有B5培養基和N6培養基。

製備培養基時，應注意：

使用預先配製的母液時，在稱量各種母液前，應輕輕搖晃裝有母液的瓶子，如果發現瓶內有沉澱、懸浮物或微生物汙染，應立即將母液排除，重新配製; 為了防止母液被微生物汙染，將有機母液儲存在冰箱中4;

在用量筒或移液管測量介質母液之前，必須用被測母液將量筒或移液器清洗兩次;

測量母液時，最好按照測量的順序在紙上寫下各種母液，測量1種，劃掉1種，以免出錯。 溶解瓊脂。

用粗天平分別稱量瓊脂9

g. 蔗糖30g，放入1

ml搪瓷量杯，再加入750蒸餾水

ml，用電爐加熱，用玻璃棒攪拌，同時加熱至液體半透明。 然後將製備的混合培養基加入煮沸的瓊脂中，最後加入蒸餾水，使體積設定為1

ml，攪拌均勻。

需要注意的是，在加熱瓊脂和製備培養基的過程中，操作者不得離開，否則沸騰的瓊脂會溢位，需要重新稱重準備。 此外，如果沒有搪瓷量杯，可以使用大燒杯代替。 但需要注意的是，大燒杯底部的外表面不應潮濕，否則燒杯加熱時容易爆炸，導致溶液溢位，造成燙傷。

用滴管調節pH值以吸收濃度為1的物質量

將NaOH溶液的Mol L逐滴滴入熔融介質中，邊滴邊攪拌，隨時用pH試紙測定介質的pH值，直至介質的pH值約為6。 培養基的分裝。

熔化的培養基應趁熱分裝。 要等分，將培養基倒入燒杯中，然後倒入錐形瓶（50

ml 或 100

毫公升）。 小心不要讓介質沾到瓶子的口和壁上。 錐形瓶中的培養基量約為錐形瓶體積的 1 5 1 4。 每 1

ml培養基，可分裝25至30瓶。 介質分配後，應及時密封瓶子。 使用2張硫酸紙（每張大小約9張）

cm 9cm）夾層1層薄牛皮紙封住瓶口，並用繩子綁住。最後，將標籤貼在錐形瓶的外壁上。

1.元素多（母液）。

nh₄no₃、kno₃、cacl₂·2h₂o、mgso₄·7h₂o 、kh₂po₄。

2.微量元素（母液）。

ki、h₃bo₃、mnso₄·4h₂o、znso₄·7h₂o、na₂moo₄·2h₂o、cuso₄·5h₂o、cocl₂·6h₂o。

3.鐵鹽（母液）。

feso₄·7h₂o₅、na₂-edta·2h₂o。

4.有機成分（母液）。

肌醇、B菸酸、鹽酸吡哆醇（維生素B6）、鹽酸硫胺素（維生素B1）、甘氨酸。

以上各種營養成分的用量，除母液為濃縮液的20倍外，其餘均為濃縮液的200倍。

1.實驗所需的儀器裝置。

2.實驗安排及要求：班級分組（6-7人）每組準備500毫公升固體培養基，3.在演示的同時解釋實驗方法和步驟。

1.計算並填寫媒體成分列表。

計算公式：母液 製備母液倍數。

激素製備 培養基中所需的激素濃度 母液的激素濃度。

2.每組取500ml燒杯，加蒸餾水300ml，用天平稱取瓊脂4g，放入蒸餾水中，在電爐上加熱溶解。 稱取15g蔗糖加入溶解的瓊脂中。

3.按配方取出各種母液，放入溶解的瓊脂和蔗糖溶液中，用玻璃棒攪拌混合，加蒸餾水，定體積為500ml

4.將pH值調節為1molL的NaOH或1mol的LHCL，可用pH精密試紙或酸度計測定。

5.使用培養基分配器具將 500 ml 培養基分裝到您選擇的 15 個燒瓶中。

6.用封口膜、衛生棉條或其他封口包裹瓶口並標記。

7.將分隔的培養基和各種待滅菌器皿、蒸餾水等放入高壓滅菌器的滅菌桶中，外鍋加水至水位。 蓋上鍋蓋，擰上螺絲，開啟電源加熱。

當鍋內溫度達到或接近時，開啟排氣閥排出鍋內的冷空氣，然後關閉排氣閥，繼續加熱直到溫度達到或或，保持20 30min切斷電源，讓鍋內的氣壓自然下降，當壓力降至零時， 開啟排氣閥，排出剩餘的蒸汽，然後開啟蓋子取出介質和滅菌物品。

8.培養基和滅菌物品在室溫下自然冷卻後，存放在陰涼、乾燥、清潔的地方以備後用。

4.總結高壓滅菌器滅菌的原理和一般操作步驟。

1.大量的元素成分：

硝酸鉀 kNO3： 1900 mg L; 硝酸銨NH4NO3：1650mg L; 磷酸二氫鉀KH2PO 4：170mg L;

硫酸鎂MGSO4·7H2O：370mg L; 氯化鈣CaCl2·2H2O：440mg L。

2、微量元素成分：

碘化鉀 ki： ; 硼酸 H3BO3：; 硫酸錳 MnSO4·4H2O：;

硫酸鋅ZnSO4·7H2O：; 鉬酸鈉Na2MoO4·2H2O：;

硫酸銅CuSO4·5H2O：; 氯化鈷CoCl2·6H2O：.

3.鐵鹽：乙二胺四乙酸二鈉Na2-EDTA：; 硫酸亞鐵FeSo4·7H2O：.

4. 有機成分：

肌醇：100毫克公升; 甘氨酸：2mg l; 鹽酸硫胺素VB1：; 鹽酸吡哆醇VB6：;

菸酸 VB5 或 VPP：。

5.蔗糖：30克公升

6.瓊脂：7克公升

正常！ 成倍增加的藥物可能有很多元素！ 因為一些植物外植體更有可能在低濃度培養基中存活！ 這種介質稱為 1 2ms 介質！

MS培養基是當今最常用的培養基。

它含有高濃度的無機鹽，對保證組織生長所需的礦物質營養物質和加速愈傷組織生長非常有益。

由於配方中離子濃度高，即使某些成分在配製、儲存、消毒等過程中略有不同，離子之間的平衡也不會受到影響。

MS固體培養基可用於誘導愈傷組織，或用於胚胎、莖節段、芽尖和花藥培養，其液體培養基可用於細胞懸浮培養，並取得了顯著的成功。

該培養基中無機營養素的量和比例適宜，以滿足植物細胞的營養和生理需要。 因此，一般情況下，不需要新增氨基酸、酪蛋白水解物、酵母提取物和椰子水等有機新增劑。 與其他介質的基本成分相比，MS培養基的特點是硝酸鹽、鉀和銨含量高。

碳源通常用於合成細胞物質和代謝物。 氮源用於合成蛋白質、核酸和含氮代謝物。 水是一種常見的用途。

無機鹽如上所述。