細胞可以在沒有緩衝溶液的情況下培養嗎？

在細胞培養中，細胞的呼吸會產生大量的CO2，水的結合會降低細胞生長環境的pH值（酸化），不利於細胞的培養，以保證細胞的培養環境處於合理的酸鹼平衡環境中， 有必要在培養基中加入緩衝液以中和部分CO2，以保證培養物的pH平衡。

1. PBS（磷酸鹽緩衝鹽水）磷酸鹽緩衝液。

溶液：磷酸氫二鈉溶液、磷酸氫氫二鈉（無水）、氯化鈉加去離子水或雙蒸水至1000ml

溶液：磷酸二氫鈉溶液、磷酸二氫鈉（無水）、氯化鈉加去離子水或雙蒸水至1000ml

液A、B應儲存在4，使用時按表3-2所示比例配製至所需pH濃度，高壓滅菌後室溫儲存。

目的：緩衝液有助於保持恆定的pH值。 溶液的滲透壓和離子濃度通常與人體的pH值相似（等滲）。

2.HEPES液體。

化學穩定且在範圍內的生物緩衝液比 NAHCo3 緩衝液具有更強的緩衝能力。

HEPES英文全稱為：4-（2-羥乙基）-1-哌嗪乙磺酸; n-2-hydroxyethylpiperazine-n'-2-ethanesulfonic acid; 2-[4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazine]ethanesulfonic acid

中文全稱：4-羥乙基哌嗪乙磺酸; N-（2-羥乙基）哌嗪-N'-2-乙磺酸。

分子式：C8H18N2O4S

分子量：用途：對細胞無毒性作用。 它是一種氫離子緩衝液，可在很長一段時間內控制恆定的pH值範圍。 最終濃度為10-50 mmol L，緩衝容量可以通過在一般培養基中含有20 mmolLhepes來實現。

10 mmol l 通常用於細胞培養。

10 mmol L HEPES緩衝液的製備方法如下：準確稱取HEPES，加入新鮮的三蒸水，使體積設定為1L。 過濾滅菌，分裝後儲存4。

3. NaHCO3緩衝液。

它是常規緩衝系統的一部分，但不穩定，易受空氣中CO2含量的pH值影響，影響緩衝效果。

磷酸鹽緩衝液和NaHCO3緩衝液是常用的，因為它們更易於配置且成本更低。

不，細胞代謝不會改變培養基的pH值，細胞本身對pH值敏感。

它只有緩衝作用，沒有緩衝作用，緩衝液是由強鹼弱鹽-弱酸或強酸弱鹼鹽-弱鹼組成的溶液體系，硼砂是四硼酸鈉，屬於強鹼弱鹽，只對酸有緩衝作用，對鹼的緩衝作用很弱。 要計算pH值，需要知道四硼酸的電離常數ka，讓它為二元酸，那麼硼砂溶液的pH值為7+，C是溶液的濃度，適用於沒有特別稀釋的溶液。

對於病毒感染細胞時是否使用血清，要看你接種的病毒是否對血清敏感，如果敏感，則必須用無血清培養基，即維持液稀釋病毒，如流感病毒; 如果病毒對血清不敏感，可適當取一定濃度的血清（優選在5%以內）進行培養，如腺病毒，因此是否有必要新增血清。

細胞計數。 接種次數根據計數量和培養量確定。 鋪板或傳代具有細胞數的近似範圍，並據此確定使用的培養基量。

建議大家最好買現成的粉末，水可以蒸四次，混合後高壓滅菌後可以直接使用，非常方便。 如果您感到不自在，可以新增一些抗生素。 如果可以的話，也可以直接購買液體。

加入去離子水至1000ml，調節pH值至7準備十個1ooml小瓶，1L容量瓶，浸泡酸處理，購買PBS包，一般一包一公升。 裝滿容量瓶後，分成十個小瓶，並用塞子塞緊。

然後將針頭插入每個插頭。 將其放入高壓滅菌器中並消毒。

它應該用於觀察溶液的pH值。 在實驗室中，過多的酸或鹼可能會殺死細胞，需要更換培養基或緩衝溶液。